Resumen

Introducción: Las Leptospira spp. patógenas poseen LipL 32, una lipoproteína considerada un factor de virulencia de especies patógenas al estar ausente en los serovares saprófitos. El objetivo del estudio fue estandarizar un protocolo de qPCR que detecte el gen codificante de LipL 32 de Leptospiras spp. patógenas en sangre, suero y orina humana. Metodología: Estudio transversal en donde se extrajo ADN de Leptospira icterohaemorragiae (2 EG/μl) de cultivo en medio EMJH, además de sangre, suero y orina inoculadas con la misma concentración bacteriana. Se calculó el límite de detección para cada tipo de muestra del protocolo de qPCR propuesto. Resultados: Los límites de detección oscilaron entre 2.0 x 101 EG/μl (orina y suero) a 2.0 x 10⁰ EG/μl (sangre total). Observamos un amplio rango dinámico para el protocolo propuesto (2.0 x 10⁰ - 2.0 x 10⁸ EG/μl) utilizando sangre total, con un coeficiente de correlación r = 0.993. Adicionalmente, examinamos 75 sueros de pacientes sospechosos de leptospirosis (≤ 5 días de evolución) con el protocolo propuesto identificándose un caso positivo. Conclusiones: Se estandarizo un protocolo de qPCR sensible, específico y rentable para la identificación de leptospirosis aguda. El protocolo propuesto puede ser utilizado como herramienta para el diagnóstico de Leptospirosis aguda, enfermedad manifestada como síndrome febril inespecífico ó como un cuadro hemorrágico que puede ser fatal y que puede presentarse en nuestra población.

Palabras clave: Leptospira spp Lipoproteína LipL 32 qPCR ADN.

2015-07-06   |   513 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 2 Núm.4. Octubre-Diciembre 2014 Pags. 111-121 Avan Cien. Sal Med 2014; 2(4)