Giardia duodenalis: análisis de la expresión de la enzima málica mediante isoelectroenfoque

Autores: Ponce Macotela Martha, Martínez Gordillo Mario Noé, Alvarez Chacón Rubén

Resumen

Se propone la creación de una base de datos con los puntos isoeléctricos (pl) de las isoenzimas de Giardia duodenalis. En este trabajo se analizó, mediante isoelectroenfoque, el comportamiento de las isoenzimas de la enzima málica en diez aislados de G. duodenalis obtenidos de niños mexicanos. El electroenfoque se realizó en una cámara vertical en geles de acrilamida al 5.5%, anfolitos al 6.5% con límites de pH entre 3 y 10, y glicerol al 10%. Cada una de las muestras (10 mg) y una serie de proteínas con pl conocido se analizaron, por duplicado, en tres experimentos. Se preenfocó a 200 V, 1.5 W durante 0.25 horas, y se enfocó a 2100 volt-hora a 3 W, 800 V. Se obtuvo una ecuación de los desplazamientos de las proteínas con pl conocidos Y = 1.886 + 5.709 (X) (error estándar de X = 0.001 y Y = 0.136), con la que se calcularon los pl de cada una de las isoenzimas de la enzima málica que se encontraron en los aislados de G. duodenalis. Las isoenzimas presentaron pl en el intervalo de 5.70 a 7.63, y la clona INP-1000588-CMG1 se diferenció del aislado paternal porque éste presentó tres isoenzimas con pl de 7.34, 7.16 y 6.99. Es de gran utilidad conocer los puntos isoelectricos de las isoenzimas que se expresan en Giardia duodenalis ya que permite establecer comparaciones numéricas para determinar su variabilidad genética.

Palabras clave: Giardia Isoenzimas de Giardia.

2003-03-17   |   1,985 visitas   |   1 valoraciones

Vol. 45 Núm.4. Julio-Agosto 1993 Pags. 371-374. Rev Invest Clin 1993; 45(4)