Autores: Domínguez Meléndez Vanihamín, Barranca Enriquez Antonia, Pérez Pinetti Patricia Adriana, Marín Escamilla Yessica Nayeli, Flores Primo Argel, Palmeros Exsome Carolina, Acevedo Marrero María de los Ángeles
Introducción
La medicina tradicional forma parte de nuestra cultura Nacional. El uso de plantas como medio alternativo para combatir ciertas enfermedades tales como infecciones bacterianas, parásitos, heridas e inflamaciones ha sido utilizada desde hace cientos de años (1). Momordica charatia (Mc), una planta perteneciente a la familia de las concurbitacinas, ha sido utilizada en la medicina tradicional mexicana y se ha demostrado que es un antibiótico natural (2) , actividad antidiabética in vivo en un modelo en ratas (3), un potente estimulador de macrófagos in vitro (4), presenta actividad anti inflamatoria in vivo (5), y de manera interesante se ha demostrado su actividad antitumoral in vitro (6) a pesar de toda esta evidencia no existe un antecedente solido de su efecto biológico in vivo sobre células normales.
Objetivo
Este estudio está enfocado en evaluar si Mc incrementa el número de leucocitos normales en sangre periférica sin afectar su viabilidad celular.
Material y métodos
La obtención del extracto de Mc se llevó a cabo mediante maceración sin agitación utilizando una solución etanó lica al 30% (v v-1). Con 25 gr de hojas limpias de Mc, se adicionaron 100 ml de agua destilada y se homogenizó la mezcla por 5 min utilizando un homogenizador Ultra Turray T-25 basic (IKA®, Wilmintong, NC. Para extraer el etanol excedente en el extracto se utilizó un rotavapor Buchi R-250 a una temperatura de 35°C y 400 o 500 mbar, durante 25 min. Una vez obtenido el extracto, se esterilizó por filtración; para esto, las muestras se filtraron utilizando membranas estériles de Nylon Millipore® con poro de 0.22 µm, los extractos filtrados y estériles fueron almacenados en recipientes opacos estériles hasta su uso posterior. Para la aplicación de los extractos en los ratones BALB/c se prepararon 3 diferentes concentraciones 800, 1000 y 1500 µg/ml, diluyendo las muestras con solución salina fisiológica (SSF) (0.9%). Tratamiento de ratones con extracto de Mc.: Se utilizaron ratones Balb/c de 3 meses de edad, mantenidos en condiciones estériles en el bioterio de la Universidad Cristo bal Colón, todos los experimentos fueron realizados bajo las leyes y normas mexicanas para el trato y protección de ani- males, NOM-062-ZOO-1999. Los ratones fueron divididos en 5 grupos y cada grupo estuvo conformado por 5 ratones. El grupo control no recibió tratamiento alguno, el grupo vehículo recibió 1 ml vía intraperitoneal (IP) de Solución Salina Fisiológica (SSF) y los grupos de tratamiento que recibieron 1 ml de SSF con 800, 1000 y 1500 µg de Momordica charantia respectivamente. Los ratones del grupo vehículo y las concentraciones del extracto cada 48h por 7 días, al 8vo día se sacrificaron para el estudio. Obtención de sangre periférica: Después del tratamiento, los ratones fueron sedados para la obtención de muestra, se extrajo de 1 ml de sangre periférica mediante punción cardiaca y se colocaron en tubos Eppendorff con heparina de Litio para su posterior análisis en un equipo de Citología Hemática, Coulter Act 5. Viabilidad Celular: Se obtuvieron las CMN de sangre periférica y se evaluó su viabilidad mediante la técnica de azul tripano y el conteo se hizo en cámara de Neubauer y microscopio de luz Carl Zeizz. Análisis estadístico: En el presente estudio los datos se presentaron como la media y la desviación estándar de al menos tres experimentos de manera independiente. Para observar diferencias significativas (*) entre los datos se empleó un análisis de varianza (ANOVA) seguida de una prueba de Tukey (p <0.05) mediante el paquete estadístico MINITAB.
Resultados
El objetivo de este estudio era evaluar si el extracto etano lico de Mc tenia presentaba un efecto biológico sobre células normales. Los leucocitos son una población de origen hematopoyético que se encuentra en torrente sanguíneo, esta población celular está conformada por monocitos, linfocitos, granulocitos, eritrocitos y plaquetas (7) . Nosotros pudimos observar que tras la inoculación intraperitoneal de Mc el número de leucocitos totales en sangre periférica se incrementa el doble en la dosis de 1500µg/ml, sin alterar su viabilidad como se expresa en la Figura 1 A y B.
Conclusiones
Momordica charantia, una planta ampliamente utilizada en la medicina tradicional mexicana, cuando es inoculada vía intraperitoneal incrementa el número de leucocitos en sangre periférica in vivo sin alterar su viabilidad, este dato es de suma relevancia ya que abre las puertas a continuar estudiando esta planta y evaluar si influye sobre alguna subpoblación celular en específico, dato que podría tener relevancia clínica a futuro.
Palabras clave: Leucocitos proliferación Viabilidad.
2021-09-18 | 205 visitas | Evalua este artículo 0 valoraciones
Vol. 14 Núm.1. Enero-Junio 2019 Pags. 68-70 Rev Invest Cien Sal 2019; 14(1)