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 INTRODUCCION Para el conocimiento de cualquier espécimen sea cual sea su origen, como paso primario se debe de conocer variaciones, características propias de su especie, en resumen su anatomía, y bien ¿de qué forma se conoce esta anatomía? , esta fue la pregunta inicial para recurrir a técnicas de estudio ”. A lo largo de años de investigación han sido propuestas y desarrolladas varias técnicas. Todas son buenas para su fin, pero no tan viables en costos, resultados oO complicaciones que puedan perjudicar al espécimen en proceso. A finales de los años 1800, surgió un procedimiento relativamente nuevo como propuesta de Dawson/Schultz, conocido como Diafanización, que tomo fuerza en la comunidad científica años después, este proceso es también conocido en inglés como Clearing and Staining **; permite dar la propiedad de que los tejidos permitan el paso de luz a través de ellos, y de este modo la luz choque con las estructuras internas y permita al ojo humano poder visualizar dichas estructuras, el proceso se su conformación, lleva conjuntamente con una tinción previa a la diafanidad, para hacer que los objetos deseados sean aún más visibles y resalten *. OBJETIVO Trabajar el método de diafanización con especímenes animales para conocer y poder observar su anatomía que presenta, pudiendo conocer sus características, peculiaridades o bien variaciones que pudiesen llegar a tener 5 METODOLOGÍA La presente investigación es de tipo Experimental, utilizando como espécimen a las ratas tipo wistar (R. norvegicus), para las cuales fueron requeridas 20. Esta investigación tuvo lugar en el departamento de anfiteatro de la facultad de estomatología de la UASLP en el 2013. El primer paso es la sacrificacion de los roedores, se logra con una dosis de 1.5ml de pentobarbital a la altura donde se encuentra el higado, con una posición lo más recta posible se infiltra lentamente. Al haber infiltrado la sustancia, se deja al espécimen en un superficie pero sin dejar de sujetarlo, el animal tendrá un aspecto adormilado y perdiendo el conocimiento. Cuando el espécimen se encuentre sin vida se prosigue a retirar todo tejido externo, con cuidado de no lesionar el musculo. Con ayuda de un bisturí y pinzas tipo mosco se hace una incisión recta o en “Y” para empezar la remocion, esta es completa, desde la cola, patas hasta la cabeza del roedor. Hecho este paso se hace una incision empezando por debajo del torax para asi poder extraer los órganos y vísceras que no son necesarias para la investigación y dejar solo lo que interesa como en este caso es la estructura ósea y cartilaginosa *. Cuando el espécimen se encuentre eviscerado, se coloca en alcohol al 100% para fijarlo por 24 horas, posteriormente se colocara en acetona para hacerlo permeable también por 24 horas (Fig. 1). Para teñir las estructuras internas se usó, azul alciano que tiene afinidad por los ácidos polisacáridos tales como glicosaminoglicanos en los cartílagos *”. Y el 132 rojo alizarina por sus propiedades colorantes cuando existen depósitos de calcio, de igual manera por 24 horas “. Para el proceso propiamente dicho de transparentar los tejidos externos del espécimen, se usa una solución compuesta por KOH (hidróxido de potasio) y Glicerol *. Cuando esté lista esta solución, el espécimen será sumergido en un recipiente hecho de vidrio, procurando que el líquido cubra totalmente al espécimen. El tiempo aproximado es de 24 horas en especimenes pequeños, para muestras de mayor tamaño este proceso puede durar un tiempo prolongado, este proceso se puede acelerar cambiando las concentraciones del KOH y elevándolas un poco más de lo indicado, provocando un aceleramiento en el proceso pero dañando el tejido si el espécimen se encuentra mucho tiempo sumergido en él”. Ya obtenido un espécimen que permita la visibilidad de sus estructuras internas, se prosigue si así se desea a conservarlo en un recipiente de cristal con un solución a base de glicerol y alcohol etílico. De esta manera el espécimen mantendrá un estado óptimo de sus condiciones retardando la descomposición “. RESULTADOS Los especimenes animales resultantes fueron según lo esperado de los 20 en los que se trabajó, ya que los tejidos externos como los músculos obtuvieron una transparentación exitosa (Fig 2), que permitía una visibilidad de gran calidad, así como también la tinción fue la adecuada y coloreo de manera definida la estructura ósea así como cartílago. Al cabo de 96 horas aproximadamente fue que los roedores tomaron esta propiedad. CONCLUSIONES Se puede finalizar la investigación satisfactoriamente, ya que el objetivo era conocer el proceso de la Diafanización y aplicarlo a especimenes para su estudio interno. Los resultados lanzaron una nueva inquietud acerca de cómo lograr una Transparentación exitosa en órganos dentales sin que estos pierdan tejido y este también pueda participar en el proceso de Diafanización y ver cómo reacciona a dicho proceso”. La Diafanización es un proceso que permite grandes beneficios, si se necesita conocer un espécimen, pero este proceso tiene que seguir siendo modificado para elevar estos beneficios y reducir los tiempos para la obtención de la Transparentación y las cantidades que se tienen que utilizar para trabajar con especimenes de mayor tamaño, para así lograr un estudio en especimenes de tamaños más grandes que un roedor y conocer afondo las estructuras. 

Palabras clave: Diafanización anatomía tinción transparencia diafanidad

2022-01-18   |   450 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 11 Núm.1. Julio-Diciembre 2016 Pags. 130-134 Rev Invest Cien Sal 2016; 11(Supl. 1)