Resumen

Se describe un método para la purificación de las cadenas pesadas de inmuglobulina G humana (IgG) a partir de una mezcla de sueros humanos normales. La IgG se purificó por precipitación con sulfato de amonio y cromatografía de intercambio iónico en DEAE-Sephacel. La preparación purificada fue homogénea por electroforesis en gel de poliacrilamida en presencia de dodecilsulfato de sodio (SDS-PAGE) e inmunoelectroforesis. El recobrado final de purificación de la IgG fue de 68.78 % y un factor de purificación de 4.01. Las cadenas gamma se obtuvieron por reducción con ditiotreitol y alquilación con yodoacetamida de la IgG. La separación de las cadenas pesadas y ligeras se realizó por filtración en gel en Sephacryl S-100 en dos columnas conectadas en serie. La preparación obtenida fue homogénea por inmunodifusión doble y SDS-PAGE. El peso molecular relativo de las cadenas pesadas fue de 58.5 kDa. El rendimiento obtenido fue de 0.603 mg de cadenas pesadas/mg de IgG.

Palabras clave: IgG humana separación de las cadenas pesadas y ligeras de la IgG inmunoglobulina inmunoensayo fraccionamiento.

2003-05-16   |   1,622 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 27 Núm.4. Octubre-Diciembre 2002 Pags. 107-111. Bioquimia 2002; 27(4)