Metodología diagnóstica

Desarrollo de radioinmunoensayos para cuantificar testosterona, progesterona y cortisol plasmáticos con trazadores radiactivos yodados 

Autores: Nisembaum Alas Amparo Teresa, Machado Curbelo Ada Julia, Santander López Ana Maribel, Chapé Puerta Alina

Resumen

El objetivo del presente trabajo fue desarrollar RIAs para la cuantificación plasmática de testosterona (T), progesterona (P) y cortisol (C) utilizando trazadores radiactivos yodados. Los radio-olingandos se prepararon según el método descrito por Nars y Hunter, modificado en el paso de la purificación. Se probaron las inmunorreactividades frente a antisueros anti-T-3CMO: BSA (INEN), anti P-3CMO: BSA (HRP/WHO) y anti C-CMO:BSA (HRP/WHO). Se obtuvieron como diluciones de trabajo 1:200 000 para la T, 1:675 000 para la P y 1:700 000 para el C. Se estudió la estabilidad en el tiempo de los trazadores radiactivos ensayando 2 formas de conservación: liofilizado y en solución etanólica a 4°C, éstos se mostraron estables hasta 100 (T), 127 (P) y 112 (C) días luego de preparados. Los RIAs fueron validados en cuanto a sensibilidad (T:3,02 pg/tubo; P:28,17 pg/tubo y C:5,3 pg/tubo); precisión (T CV intraensayo: 4,90-6,19 % y CV intraensayo: 14,30-16,96 %: P CV intraensayo: 9,5-13,5 % y CV interensayo: 11-17,5 %) y recobrado (T:95,45-98,15 %; P:98,20-98-70 % y C:98,9-107 %). No se hallaron diferencias significativas (p < 0,05) en los ensayos de paralelismo, en el análisis de regresión para recetas de primera clase. Además, se compararon con los RIAs del Programa de Reproducción Humana de la OMS (HRP/WHO): 200 muestras para la T, 135 para la P y 50 para el C sin encontrar diferencias significativas (p < 0,05) al aplicar el test t de Student para series pareadas con coeficientes de correlación altamente significativos. Estos RIAs, de acuerdo con su exactitud, sensibilidad y precisión, pueden utilizarse como ensayos de rutina en los servicios de laboratorio de Endocrinología.

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2003-09-30   |   617 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 8 Núm.1. Enero-Abril 1997 Pags. 39-48 Rev Cubana Endocrinol 1997; 8(1)