Resumen

Introducción. El óxido nítrico (NO•) es un importante modulador de múltiples procesos fisiológicos y fisiopatológicos, por lo que ha existido gran interés en contar con métodos que permitan medir fácilmente la generación de esta molécula. Una forma indirecta de medir la producción de NO• es mediante la cuantificación de sus metabolitos estables los nitritos y nitratos (NO₂– + NO₃ –). Aunque existe a la venta un equipo o estuche para detectar la concentración de NO₂ – + NO₃ –, éste tiene la desventaja de ser poco accesible y costoso. Objetivo. Validar un método fácil, accesible y de bajo costo para la determinación de nitritos y nitratos. Material y métodos. La cuantificación de NO₂ – + NO₃ – se realizó mediante la reducción enzimática de nitratos con la nitrato reductasa seguida por detección de nitritos con el reactivo de Griess. Para validar el método se cuantificó la concentración de NO₃ – en alícuotas con concentraciones conocidas de nitrato de sodio, también se detectaron los niveles de NO₂ – + NO₃ – en plasma que contenían concentraciones conocidas de nitrato de sodio y finalmente se evaluaron los niveles de NO₂ – + NO₃ – en muestras de plasma (n = 17) y ascitis (n = 11) de pacientes cirróticos. Los valores se compararon con los obtenidos por el método comercial. Resultados. El rango de detección para nitratos se encontró de 25 a 400 µM/L y de nitritos de 25 a 100 µM/L. La recuperación de concentraciones conocidas de nitratos fue en la mayoría de los casos mayor a 95%. En plasma, los niveles de NO₂ – + NO₃ – fueron de 44.6 ± 22.4 (media ± DE), siendo similares a los detectados con el estuche comercial, 40.9 ± 18.3 µM/L (p = 0.107). En las muestras de ascitis, los valores fueron de 64.5 ± 42.0 y 58.5 ± 39.3 µM/L (p = 0.172), respectivamente. Conclusiones. Por la similitud de resultados, el método aquí descrito puede considerarse como una alternativa confiable al estuche comercial en la determinación de NO₂– + NO₃– en plasma y ascitis. Además, esta metodología resulta atractiva porque no requiere de equipo especializado, es muy accesible para cualquier laboratorio, se puede realizar con una o varias muestras, pero la ventaja más importante es que el costo de procesamiento por muestra es la quinta parte de lo que cuesta el método comercial.