Resumen

Las enfermedades mieloproliferativas en ocasiones requieren de transplantes que pueden provocar el rechazo inmunológico, problema que parece no presentarse en el transplante de células fusionadas. En este trabajo se establecieron condiciones óptimas para la electrofusión de células hematopoyéticas de rata. Se obtuvo la médula ósea del fémur en rata y se separaron las células en gradientes discontinuos de percoll; se marcaron con esferas de látex y agar teñido. La agregación celular se provocó con un campo de radiofrecuencia de 0.5 MHz y 10 V por 10, 15, 20, 25 seg. y con concentraciones celulares de 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 4.5, 5.0 x 10⁵ cels/mL en relación 1:l con diferente marcaje. La fusión se realizó con un pulso de corriente directa de 300 V por 1 mseg. Las células híbridas se identificaron por su diferente marcaje y número de núcleos, el rendimiento y la viabilidad se determinaron por microscopia. Los mejores resultados se obtuvieron al aplicar 20 seg. de radiofrecuencia de 4.5 x 10⁵ cels/mL con un rendimiento de 4.11% de los heterodicariontes y viabilidad del 100%. Con base en los resultados obtenidos y con las adecuaciones necesarias, este método podría utilizarse en el manejo de alteraciones mieloproliferativas en diferentes especies incluyendo al hombre.

Palabras clave: Electrofusión células hematopoyéticas heterodicariontes hemodicariontes gradientes de percoll.

2004-08-28   |   818 visitas   |   1 valoraciones

Vol. 21 Núm.2. Abril-Mayo 1996 Pags. 471-476 Bioquimia 1996; 21(2)