Resumen

Objetivo: Diseñar péptidos sintéticos que correspondan con las regiones antigénicas del dominio de unión al ligando (LBD) del receptor de estrógeno humano (REh) a través de métodos de cómputo, para su uso como inmunógenos en la generación de anticuerpos policlonales y monoclonales. Materiales y métodos: Las secuencias de proteínas se ex-trajeron de la base de datos SWISS-PROT utilizando el servidor WWW SRS (http://srs.ebi.ac.uk). El programa CLUSTALW, se utilizó para crear el alineamiento múltiple de secuencias de proteínas entre diferentes especies. Para el cálculo de las propiedades antigénicas del REh, se tomó su estructura tridimensional (código PDB: 1a52). La caracterización preliminar de los sueros policlonales, obtenidos de ratones inmunizados con los péptidos sintéticos diseñados, se realizó mediante las técnicas de ELISA e inmunohistoquímica (IHQ). Resultados: Basado en la estructura cristalográfica del LBD se realizó la predicción de los sitios antigénicos para REh. Se diseñaron seis péptidos sintéticos correspondientes a regiones accesibles en la superficie de la molécula. Los antisueros de ratones inmunizados con el péptido E7-10 y el extracto nuclear de células MCF-7 presentaron un marcaje citoplasmático y nuclear, similar al que producen los anticuerpos anti-REh comerciales. Conclusión: El péptido E7-10, correspondiente a la región C-terminal del LBD, generó anticuerpos policlonales capaces de reconocer al REh citoplasmático y nuclear en células de tejido de cáncer de mama, siendo un candidato interesante para la obtención de reactivos biológicos de diagnóstico de esta molécula.

Palabras clave: Dominio de unión al ligando receptores nucleares receptor de estrógeno humano.

2006-03-02   |   2,034 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 3 Núm.2. Abril-Junio 2004 Pags. 26-32 Gamo 2004; 3(2)