Desarrollo y validación de un modelo de cultivo in vitro para el estudio de la diferenciación del trofoblasto humano

Autores: Martínez Flores Alfonso, Beltrán Montoya Jorge, Ortega Aguilar Alicia, Vadillo Ortega Felipe

Resumen

Objetivos: Desarrollar un método para aislar células de citotrofoblasto humano y evaluar su capacidad invasora y de diferenciación. Tipo de estudio: Biomédico experimental. Material y método: Se aislaron citotrofoblastos de placentas sanas de embarazos a término por digestión con dispasa y purificación en gradiente de densidad. Se evaluó la pureza por inmunorreactividad a la citoqueratina 7 y la invasividad de las células del citotrofoblasto en Matrigel. La actividad enzimática se determinó por medio de zimografía y la hCG secretada se cuantificó por ELISA. La expresión de integrinas alfa 1 y alfa 5 se evaluó por inmunohistoquímica. Resultados: Se obtuvieron citotrofoblastos con pureza del 97%, que se diferenciaron, de manera espontánea, a un sincitio después de cuatro días; se acompañó de producción creciente de hCG. La invasividad de los citotrofoblastos fue máxima los primeros dos días, cuando su fenotipo fue mononuclear y coincidió con la secreción de pro-MMP-9, y disminuyó con el tiempo de cultivo. La inmunorreactividad a las integrinas alfa 1 y alfa 5 se observó en las células del citotrofoblasto con el fenotipo mononuclear y fue menor en células con fenotipo de sincitio. Conclusiones: Se desarrolló un modelo in vitro que replica eventos del desarrollo temprano de la placenta, que emulan la etapa de invasión y de diferenciación del citotrofoblasto. Este modelo tiene utilidad potencial en el estudio de los mecanismos de daño en la preeclampsia.

Palabras clave: Trofoblasto humano diferenciación.

2006-12-14   |   1,395 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 74 Núm.12. Diciembre 2006 Pags. 657-665 Ginecol Obstet Méx 2006; 74(12)