Resumen

El objetivo del presente trabajo fue dilucidar el mecanismo de acción antiviral de la cecropina A (CA) frente al virus Junín VJ, agente etiológico de la fiebre hemorrágica argentina. Células Vero infectadas con VJ (5 UFP/cél.) y tratadas durante 48 h con CA 10 mM se incubaron con 35S-Met y las proteínas marcadas (precipitadas con un Ac monoclonal anti N) se analizaron por SDS-PAGE. La CA redujo en forma específica la síntesis de proteína N. Se analizó el efecto del agregado o remoción de CA a distintos tiempos post-infección sobre la producción de virus. Durante las primeras 5 h de infección no se afectó la producción viral. Ccuando la remoción del compuesto se realizó a las 8 h p.i. el rendimiento de virus liberado disminuyó un 90 % respecto al control sin tratar, mientras que el título de virus asociado a células se redujo sólo en un 47 %. Así, la CA no afectaría las etapas tempranas del ciclo de replicación viral, mostrando un efecto inhibitorio sobre la liberación de virus infeccioso al medio extracelular. Se midió el transporte a membrana plasmática de la glicoproteína viral G1 por inmunofluorescencia indirecta (IFI) total y de membrana, en células infectadas con VJ (0,1 UFP/célula), tratadas o no con CA 25 mM durante 24 h. y se determinó el rendimiento viral a las 24 hs. p.i. por el método de UFP. En el ensayo de IFI total el número de células fluorescentes en los cultivos tratados se redujo un 26,5% respecto del control, pero las células infectadas y tratadas con CA exhibieron un acúmulo de fluorescencia perinuclear. La expresión de G1 en membrana se redujo alrededor del 50 % en los cultivos tratados respecto al control, indicando que este compuesto afectaría la llegada o inserción de G1 en la membrana celular. El egreso de la progenie viral se vió más afectado que la expresión de antígeno en membrana. Los principales blancos de la acción antiviral de la CA frente al VJ serían la morfogénesis y el egreso de partículas virales infecciosas al medio extracelular.

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2007-01-23   |   2,914 visitas   |   1 valoraciones

Vol. 2 Núm.1. Abril 2003 Pags. Qviva 2003; 2(1)