Resumen

En este trabajo se investigaron distintos pasos del ciclo de multiplicación del virus Junín (VJ), en células polarizadas Vero1008 y A549. Las monocapas fueron crecidas sobre filtros de polietileno de 1 mm de poro hasta obtener confluencia y verificar su polarización. Para la determinación de virus adsorbido e internalizado se midió la radioactividad incorporada en cultivos previamente infectados con virus marcado. Los valores de adsorción registrados en células infectadas por la cara apical (A) fueron significativamente mayores a los obtenidos en la cara basolateral (BL). No se encontraron diferencias en la internalización del virus en las células Vero1008 o A549 sugiriendo sólo una adsorción preferencial del virus por el dominio apical. Para analizar la síntesis de proteínas se infectaron ambas líneas por la cara A y BL, a distintos tiempos p.i. se determinó la presencia de la nucleoproteína por la técnica de WB. El análisis de las bandas obtenidas confirman que el VJ entra y multiplica en los cultivos epiteliales independientemente de la superficie de los mismos. Para estudiar los pasos finales del ciclo de multiplicación del VJ se realizó la marcación de su glicoproteína utilizando la técnica de IFI. Se observó mayor expresión de la misma en la cara A independientemente de la superficie infectada. Al mismo tiempo se midió la infectividad en los sobrenadantes correspondientes. Los títulos virales fueron aproximadamente 50 veces mayores en los sobrenadantes de la cavidad A con respecto a la BL. Estos estudios demuestran que los cultivos utilizados son susceptibles a la infección por VJ siendo la entrada como la salida preferencial por la superficie apical.

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2007-01-24   |   3,678 visitas   |   2 valoraciones

Vol. 2 Núm.1. Abril 2003 Pags. Qviva 2003; 2(1)