Caracterización de la infección persistente del virus Junín en células BHK-21

Autores: Ellenberg P, Scolaro L.A.

Resumen

El objetivo del trabajo fue estudiar la presencia y expresión de los genes de la nucleoproteína (N) y glicoproteína (G1) del virus Junín, agente etiológico de la fiebre hemorrágica argentina (VJ), durante la infección persistente del mismo en células BHK-21 (fibroblastos de hámster). Las células persistentemente infectadas con la cepa de VJ XJCl3, denominadas K3, resultaron morfológicamente indistinguibles de los controles sin infectar y produjeron virus infeccioso con títulos que oscilaron entre 103 y 105 UFP/ml. En dichas células se detectó la presencia de los genes virales de N y GPC (precursor de G1 y G2) bajo la forma de ARN pero no de ADN. También se estudió la síntesis y expresión de N y G1 mediante inmunofluorescencia (IFI), western blot (WB) y radioinmunoprecipitación (RIPA), utilizando anticuerpos monoclonales anti-N y anti-G1. Durante el lapso estudiado, las células K3 fueron reactivas por IFI tanto para N (antígeno citoplasmático) como para GPC/G1 (antígeno citoplasmático y de membrana). Se comprobó por WB una expresión diferencial de N (60-64 kDa) respecto de la infección aguda, ya que se observaron bandas de PM 40-42 y 20-23 kDa, correspondientes a los productos de degradación de N, los que aparecieron al cabo de 8 h de subcultivadas las células. Las células K3 presentaron la capacidad de fusionarse a bajo pH, hecho que permitió inferir la presencia de G2 (proteína fusogénica) en la membrana de las mismas. Estos resultados permiten concluir que la infección persistente del virus Junín en células BHK-21 sería una consecuencia de la regulación del potencial citopático del virus en general y no de una modulación negativa ejercida a nivel de N o GPC en particular.

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2007-01-24   |   1,900 visitas   |   1 valoraciones

Vol. 2 Núm.1. Abril 2003 Pags. Qviva 2003; 2(1)