Resumen

El objetivo de este trabajo fue analizar si la proteína de matriz (M) del virus de la estomatitis de vesicular (VSV) induce apoptosis cuando se expresa en ausencia de otro componente viral. Se empleó un plásmido que contiene el gen de la proteína M (pKM+) y el mismo plásmido vacio (pKM-) como control, además se utilizó un plásmido que expresa el gen de la $-galactosidasa (p$gal). Con dichos plásmidos se cotransfectaron células COS-7 en una relación de ADN plasmídico para pKM+ o pKM- respecto a p$gal de 10 a 1. Se analizó la expresión de la $-galactosidasa incubando las células cotransfectadas con un sustrato cromogénico que tiñe de azul las células que expresan dicha enzima. Se detectó una reducción de aproximadamente el 80% de células azules en la contransfección de pKM+/p$gal respecto al número de células azules en la cotransfeción pKM-/p$gal. Además las células cotransfectadas con pKM+ mostraron una marcada morfología apoptótica tanto en las pocas células azules como en células no teñidas, la cual fue visualizada como redondeamiento celular, deformación de la membrana citoplasmática y formación de burbujas. Para confirmar presencia de apoptosis se observó la morfología nuclear de las células cotransfectadas empleando tinción con bisbenzimida y la fragmentación del ADN cromosomal mediante la técnica de TUNEL. Estos ensayos dieron positivo sólo en las células cotransfectadas con pKM-/p$gal o simplemente transfectadas con pKM+. Por otro lado, la expresión de la proteína M fue evaluada mediante immunofluorescencia con un anticuerpo monoclonal específico. Los resultados demuestran que la proteína M de VSV es capaz de inducir apoptosis, sugiriendo que ésta podría ser la responsable del gatillado del proceso apoptótico en los inicios de la infección viral.

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2007-01-24   |   2,522 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 2 Núm.1. Abril 2003 Pags. Qviva 2003; 2(1)