Expresión de RpoS en cultivos hambreados en carbono de Pseudomonas oleovorans

Autores: Ruiz J.A., López Nancy I, Méndez B.S.

Resumen

En bacterias Gram negativas el factor sigma RpoS (σs) regula la expresión de genes involucrados en la supervivencia ante condiciones de estrés. En Enterobacterias el tetrafosfato de guanosina (ppGpp) está involucrado en el control de la transcripción de rpoS. Trabajos previos realizados en nuestro laboratorio con P. oleovorans GPo1 y su correspondiente mutante incapaz de degradar polihidroxialcanoato (PHA), GPo500, demostraron que la degradación de PHA estaba relacionada con la acumulación de ppGpp. Se analizó la tolerancia a estrés térmico y oxidativo y el contenido intracelular de σs durante la depolimerización de PHA. El nivel de σs se evaluó mediante Western Blot utilizando un suero policlonal anti-RpoS de ratón. La proteína RpoS se detectó durante la fase exponencial de crecimiento en ambas cepas y su contenido aumentó durante la entrada en la fase estacionaria. Para favorecer la degradación del polímero, los cultivos, en condiciones de acumulación de PHA, se sometieron a hambreado en C. Luego de 90 min. los gránulos de PHA disminuyeron notablemente y los ensayos de resistencia a estrés térmico y oxidativo mostraron una mayor resistencia de la cepa salvaje que la cepa mutante. Por Western Blot se demostró que el nivel de RpoS es levemente mayor en P. oleovorans GPo1 comparado con la cepa mutante incapaz de degradar el PHA, GPo500, después de 30 y 90 min. de hambreado en C. Los resultados sugieren que existe una relación entre la utilización de PHA y la expresión de RpoS. La mayor tolerancia al estrés observada en la cepa salvaje, podría deberse a la mayor cantidad de σs observada. Sin embargo, los mecanismos implicados en la regulación de la expresión de RpoS son variados y complejos y sus niveles pueden ser modulados a partir de distintas señales ambientales.

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2007-01-25   |   1,580 visitas   |   2 valoraciones

Vol. 2 Núm.1. Abril 2003 Pags. Qviva 2003; 2(1)