La localización subcelular de P8 es dependiente de la densidad celular

Autores: Valacco M.P., Varone C.L., Cánepa Eduardo T, Iovanna J.L., Moreno Silvia M.

Resumen

p8 es una proteína de 8 kDa, cuyo gen se induce durante la fase aguda de la pancreatitis. Su mRNA se expresa en líneas celulares en respuesta al estrés. Resultados preliminares sugieren que podría actuar como un factor de crecimiento celular cuando se sobreexpresa en algunas líneas celulares. Análisis teóricos de la secuencia de hp8 demostraron que la proteína posee una putativa señal de localización canónica bipartita. El objetivo del presente trabajo consiste en el análisis de homologías de secuencias y en estudiar la localización celular de p8. Al realizar análisis de homologías de secuencias en bases de datos, se encontró que además de la ya conocidas, existe una alta homología entre hp8 y otras especies de eucariotas superiores y se vio que las lisinas de la putativa NLS, se encuentran totalmente conservadas en todas estas especies. Para el estudio de localización celular de p8, se utilizo una técnica inmunocitoquímica utilizando anticuerpos policlonales anti-p8. Se vio que la localización subcelular de p8 depende de la densidad de las células en cultivo. En cultivos de alta densidad, donde las células están muy confluentes, p8 se localiza en el citoplasma, en cultivos de baja densidad donde las células están aisladas, p8 localiza en el núcleo. Realizamos estudios de localización a lo largo del ciclo celular y se vio que en células arrestadas en G1, la proteína se encuentra en el citoplasma a pesar de que el cultivo sea de baja densidad. También se vio que la importación de la proteína al núcleo es dependiente de transporte activo, ya que en cultivos de baja densidad depletados de ATP la proteína queda retenida en el citoplasma. Quedan por realizar estudios para dilucidar los mecanismos por los cuales p8 migra entre núcleo y el citoplasma dependiendo de la densidad.

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2007-01-25   |   1,427 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 2 Núm.1. Abril 2003 Pags. Qviva 2003; 2(1)