Comportamiento genotóxico y antigenotóxico de extractos de Vallesia Glabra en el ensayo cometa

Autores: García Franco S, Prieto González Elio Antonio, Baltar O.S., Fuchs J., Kesten E., Wood Evan

Resumen

Estudios anteriores demostraron que extractos metanólicos de hojas verdes de Vallesia glabra presentan propiedades anti-insectos y toxicidad aguda en Artemia salina, posiblemente por interferencia con las fuentes de energía celular. En este trabajo se presentan resultados de estudios de genotoxicidad mediante el Ensayo Cometa de extractos de la misma planta. Dichos extractos fueron preparados mediante el tratamiento de hojas secas molidas con metanol (M) o agua (A), con agitación suave toda la noche a temperatura ambiente. Células L929 fueron cultivadas en placas de 96 cavidades durante 24 h. antes del enfrentamiento con los extractos. El número de células por punto fue de 4 x 104. Todas las cavidades fueron observadas al microscopio 18-24 h. posteriores a la inoculación. La IC50 se calculó por la captación de los colorantes vitales Cristal Violeta (IC50 M = 0,25g/ml; IC50 A = 1,5 g/ml) y Rojo Neutro (IC50 M = 0,125 g/ml; IC50 A= 0,5 g/ml). El Ensayo Cometa (electroforesis alcalina de células aisladas en gel de agarosa) se realizó en paralelo con la evaluación de la citotoxicidad. Se utilizaron células de las cavidades tratadas hasta dosis donde no había efecto citotóxico (supervivencia superior al 75%). Las células se mezclaron con agarosa de bajo punto de fusión y se incubaron en una solución lisante a fin de favorecer la migración del ADN en una electroforesis a pH 13. Las preparaciones fueron teñidas con bromuro de etidio y evaluadas en un microscopio de fluorescencia. Se analizaron 50 nucleoides por cada concentración, en experimentos triplicados. El daño al ADN mostró una tendencia creciente con el aumento de concentración del extracto metanólico, y una disminución significativa (r=0,978) al aumentar la concentración del acuoso, lo que puede interpretarse como el resultado de la acción diferencial de componentes de diferente polaridad sobre el material genético. Agradecimientos: A la Universidad de Buenos Aires, por el subsidio TX34/1998-2000.

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2007-01-31   |   4,579 visitas   |   1 valoraciones

Vol. 1 Núm.1. Abril 2002 Pags. Qviva 2002; 1(1)