Expresión de Hsp70 en células MDCK inducida por compuestos de secreción del nematodo T. spiralis

Autores: Cardona Félix César Salvador, Barbosa Cisneros Olga Yadira, Alvarado Cuevas Zazil Donaxí, Macías Pérez Martha Edith, Sánchez Rodríguez Sergio Hugo

Resumen

La Triquinosis es una enfermedad parasitaria causada por el nematodo Trichinella spiralis. Se transmite al hombre por la ingesta de carne parasitada, mal cocida o cruda, sobre todo de cerdo. Durante su implante en un huésped, se une a la pared intestinal, copula y las larvas recién nacidas cruzan el epitelio, llegan al torrente circulatorio y se aloja en músculos. De manera continua, T. spiralis secreta proteasas y/o compuestos bioactivos, que inducen estrés en las células del huésped, el cual puede ser medido a través de la sobreexpresión de un conjunto de proteínas conocidas como proteínas de choque calórico (Hsp), las cuales son constituyentes normales de las células y su síntesis se incrementa con la exposición a varias formas de estrés. El objetivo del presente estudio fue determinar si T. spiralis secreta compuestos bioactivos in vitro, cuya acción en células epiteliales MDCK inducen estrés, medido a través de la expresión de la Hsp70. Metodología: Infectar ratas Long Evans con T. spiralis, sacrificar las ratas y obtener a T. spiralis por digestión artificial. Los nematodos obtenidos son colocados en medio de cultivo y sometidos a diferente temperatura (4, 21 y 37° C), colectando el medio cada 24 horas, el cual después se utiliza sobre cultivos de células epiteliales MDCK. El análisis de expresión de la Hsp70 en las células MDCK fue mediante las técnicas de PAGE-SDS, Western blot e inmunodetección con anticuerpos anti-Hsp70. Resultados: T. spiralis secreta compuestos bioactivos, contra algunos de los cuales el huésped produce anticuerpos. La presencia de estos compuestos bioactivos induce estrés en las células MDCK medido a través de la expresión de la Hsp70, siendo más evidente su expresión cuando se utiliza el medio en donde se mantuvo al nematodo a 37° C. Así mismo, se observó un incremento de la Hsp70 en la fracción insoluble, indicándonos alteraciones del citoesqueleto y su posible corrección a través de la Hsp70.

Palabras clave: Trichinella spiralis proteínas de estrés térmico Hsp70.

2008-01-22   |   1,259 visitas   |   1 valoraciones

Vol. 4 Núm.1. Enero-Febrero 2008 Pags. 1-16 Arch Med 2008; 4(1)