Evaluación de la actividad resortiva de macrófagos de línea celular humana y de ratón fusionados con PEG

Autores: Guerrero Fonseca Carlos Arturo, Murillo Andrea, Cardozo de Martínez Carmen A

Fragmento

Los osteoclatos son células grandes multinucladas, tienen diferentes características que incluyen la expresión de la fosfatasa ácida resistente al tartrato (TRAP), receptor de calcitonina (RCT) y la capacidad de resorber hueso. Su origen no se ha dilucidado plenamente, sin embargo, hay evidencias que sugieren que los osteoclastos proceden de la fusión de precursores mononucleares pertenecientes al linaje monosito/macrófago. En este trabajo quisimos evaluar si es la fusión per se la que promueve la actividad de los osteoclastos o si se requiere activación previa de los precursores de osteoclastos con hormonas oteoclastogénicas. Para responder esta pregunta fusionamos artificialmente macrófagos de la línea celular U937/A (humanos) o J774 (ratón) con polietilenglicol (PEG) en un estado no confluente del cultivo. Se evaluó la capacidad de formación de “TRAP positive multinuclear cell” (TPMNC) y su capacidad resortiva sobre láminas de huevo bovino tanto en macrófagos sin estimular como pre estimulados con hormona paratiroidea (PTH), 1a, 25-(OH)2D3, dexametasona, RANKL o BMP2. Los resultados mostraron que al fusionar macrófagos con PEG de ambas líneas se aumentó el número de células TRAP positivas al igual que su capacidad resortiva. Además la confluencia del 100% y la sincronización de las células en metafase y Go aumentan la formación de TPMNC. Respecto a las hormonas, la PTH (0.01mM) aumentó la capacidad resortiva de las TPMNC, mientras que la 1a, 25-(OH)2D3, dexametasona, RANKL y BMP2 disminuyeron dicha capacidad. Concluimos que la fusión de macrófagos de las líneas celulares U937/A o J774 con PEG induce la formación de células multinucleadas con actividad resortiva y en todos los experimentos se demostró que es la fusión per se, más no los estímulos con hormonas osteoclastogénicas, excepto PTH, el evento que lleva a la formación de células con actividad resortiva.

Palabras clave: Fusión de macrófagos osteoclasto polietilenglicol TRAP resorción ósea.

2008-03-25   |   2,304 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 27 Núm.2. Junio 2005 Pags. 90-95 Medicina Ac. Col. 2005; 27(2)