Fragmento

Introducción Las enfermedades alérgicas han sufrido en los últimos años un indudable avance. Junto a la elevada prevalencia, es posible detectar un aumento en la frecuencia de pacientes polisensibilizados o multialérgicos, que al realizarles las pruebas cutáneas de alergia presentan una positividad con múltiples alérgenos que muchas veces no guardan ninguna relación entre ellos. Esto hace que el manejo de estos pacientes sea muy complicado, resultando difícil diferenciar entre alérgenos más o menos relevantes. Afortunadamente, junto al avance de la epidemia alérgica ha tenido lugar un enorme esfuerzo investigador acerca de sus mecanismos y causas, lo que ha llevado consigo un gran conocimiento de los alérgenos. Y ese esfuerzo, junto con el desarrollo de la biología molecular y de la nanotecnología, han cristalizado en la aparición de nuevas tecnologías que van a facilitar el estudio de los pacientes alérgicos, especialmente de los polisensibilizados. Los microarrays nos ayudan a penetrar en el futuro, donde el cambio en la forma de diagnosticar va a llevar implícito un cambio en la forma de tratar. Los Microarrays Los microarrays, microchip o biochips, consisten básicamente en una matriz de elementos que pueden ser de distinta naturaleza (ácidos nucleicos, proteínas…) y que son adheridos a un porta para detectar, mediante diferente metodología, distintos tipos de sustancias o componentes como son: los genes expresados por una célula, las citoquinas circulantes en un líquido biológico o los anticuerpos específi cos contra distintas proteínas. Los microarrays de ácidos nucleicos fueron los pioneros en 1995. Estos microarrays son un conjunto de ácidos nucleicos que permiten la detección de ADN complementario (ADNc). El ADNc es la copia en ADN del ARN de la célula, es decir, el conjunto de los genes que la célula ha transcrito en una situación concreta con el objetivo de sintetizar las proteínas que precisa. El conjunto del ARN que expresa una célula en un momento dado -o transcriptoma- varía en función de la situación de la célula y muchos estudios de distintas disciplinas han observado diferencias entre el transcriptoma de células o tejidos en determinadas enfermedades en comparación con el transcriptoma de un sujeto sano. Actualmente existen dos tipos de microarrays para el análisis del transcriptoma, los de ADNc y los de oligonucleótidos. La diferencia principal que existe entre ellos es que en el primer caso se compara el ADNc de dos tejidos o fl uidos biológicos en el mismo microarray empleando dos fl uorocromos distintos (p.ej. mucosa nasal infl amada versus sana) y se obtiene la diferencia de expresión entre los genes de las dos condiciones analizadas. En el segundo caso es posible comparar más de un ADNc simultáneamente, ya que se emplea un microarray para cada condición (p.e. piel de dermatitis atópica, piel sana y piel con psoriasis) y crea unos niveles de expresión en unidades arbitrarias para cada microarray necesitando de un análisis posterior de los datos para comparar las distintas condiciones entre sí. En ambos casos es necesario extraer el ARN de las células a analizar y transcribirlo a ADNc.

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2008-04-12   |   3,248 visitas   |   3 valoraciones

Vol. 38 Núm.357. Febrero 2008 Pags. 43-57. Ped Rur Ext 2008; 38(357)