123-Hihidrorodamina en la evaluacion de estallido respiratorio en granulocitos mediante citometria de flujo.

Autores: Campos Paloma, Opazo Nicolás, Castillo Juan Luis

Resumen

Introducción: En neutrófilos, durante la destrucción de los microorganismos fagocitados, se produce la formación de moléculas altamente reactivas (ion superóxido y peróxido de hidrógeno), en gran parte gracias a la actividad catalítica de la NADPH oxidasa, fenómeno denominado estallido respiratorio (ER). este estudio fue implementar y estandarizar técnica 123- DHR por citometría de flujo para le medición de ER en granulocitos. Materiales y métodos: Se evaluaron 11 sujetos voluntarios, sin antecedentes de EGC. Se utilizó sangre periférica usando heparina de litio como anticoagulante. Como activador se utilizó forbol 12 -miristato 13-acetato (PMA). Se ensayaron diferentes concentraciones finales de 123- DHR. La adquisición y análisis se efectuaron en citómetro de flujo FACSCalibur. Resultados: La concentración de 123- DHR que mejor discriminaba el ensayo estimulado del estimulado fue de 3.0 µg/ml. El 100% de los sujetos estudiados presentaron un delta de estimulación superior a un 70%. Conclusiones: Se estandariza en granulocitos, la determinación de ER usando 123- DHR por citometría de flujo, usando heparina de litio como anticoagulante.

Palabras clave: Estallido respiratorio Citometría de flujo 123-DHR PMA. EGC granulocitos.

2008-08-09   |   2,297 visitas   |   1 valoraciones

Vol. 1 Núm.1. Julio-Septiembre 2007 Pags. 17-21. Rev. Latinoam. actual. biomed 2007; 1(1)