Resumen

La baja tasa de fertilización, la asincronía en la formación de pronúcleos y el bajo desarrollo embrionario son algunas de las desventajas de la fertilización in vitro en especies de animales domésticos, principalmente en el cerdo en donde los resultados hasta ahora obtenidos no son satisfactorios. Se sabe que el fluido folicular (FF) influye en la maduración de los ovocitos in vitro, inhibiendo la maduración nuclear, pero por otro lado incrementa la maduración citoplásmica. Aunque los factores que regulan este proceso no se conocen totalmente, existen evidencias experi-mentales de que pudieran ser moléculas de naturaleza proteica. El objetivo de este estudio, fue determinar si proteínas de peso molecular hasta 100 kDa, presentes en el FF porcino, tiene influencia en la maduración de ovocitos in vitro. Las proteínas se obtuvieron por ultrafiltración, para posteriormente obtener cuatro fracciones (P1, P2, P3, y P4) por medio de cromatografía de intercambio iónico. El efecto del FF completo y de sus fracciones proteicas en la maduración nuclear (rompimiento de la vesícula germinal), maduración citoplásmica (formación de pronúcleos) y fertilización (penetración de espermatozoides y/o formación de pronúcleos) fue determinada en los ovocitos in vitro. Todas las fracciones de proteínas permitieron la maduración nuclear, indicada por la presencia de cromosomas en la segunda metafase. Sin embargo, el FF completo, inhibió la progresión de la metafase I a la metafase II. La adición de la fracción P4 y del FF completo incrementó significativamente la formación de pronúcleos (95 y 100% respectivamente), comparados con el control (70%), con respecto al total de ovocitos fertilizados (p<0.001). Por otro lado ninguna de las otras fracciones mostró diferencias significativas: P1 69, P2 75 y P3 59%. La digestión de la fracción P4 con proteasas, disminuyó significativamente la formación de pronúcleos (64 vs. 100%) Este estudio demuestra que algunos de los múltiples componentes del FF que afectan la maduración citoplásmica y por lo tanto la fertilización corresponden a proteínas.

Palabras clave: Ovocitos maduración in vitro fluido folicular cerdos proteínas FIV.

2003-01-13   |   974 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 26 Núm.3. Julio-Septiembre 2001 Pags. 59-63 Bioquimia 2001; 26(3)