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Generación y caracterización preliminar de clones de Leishmania infantum a partir de un aislamiento colombiano M Salazar, NP Duarte, C Franco, DA Londoño, JS Lugo, DM Vargas, MC López, C Clavijo. Grupo de Investigación Infecciones y Salud en el Trópico y Biología Celular y Molecular de Parásitos y Hospederos. Correspondencia: mclopezp@unal.edu.co Resumen Introducción: Es común que las cepas de Leishmania spp. utilizadas para estudios experimentales se presuman de origen clonal. Sin embargo, esta naturaleza clonal raramente es confirmada. Resulta importante por lo tanto, generar líneas celulares de parásitos de origen clonal, para su utilización en futuros estudios de la relación parásito-hospedero. Objetivo: Generar y caracterizar de manera preliminar, líneas clonales del parásito Leishmania infantum proveniente de un aislamiento colombiano. Material y métodos: Cultivo de promastigotes en medio Schneider suplementado con suero fetal bovino al 10 por ciento, a 25°C. Los parásitos fueron clonados mediante la metodología de dilución limitante. Los candidatos a clones fueron cultivados secuencialmente en placas de 96 pozos y botellas de cultivo de 50ml, hasta alcanzar un número suficiente para crioconservación. Se realizó una segunda ronda de clonación (subclonación) y criosonservación a partir de los seis clones primarios obtenidos. Se ha realizado la caracterización preliminar de dos de los 14 subclones obtenidos, mediante el establecimiento de la curva de crecimiento de las líneas celulares clonanes realizadas por triplicado y en tres ciclos independientes.

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2010-05-11   |   812 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 57 Núm.4. Octubre-Diciembre 2009 Pags. 367-375 Rev Fac Med Univ Nac Colomb 2009; 57(4)