Estandarización de un método de concentración y detección de virus entéricos en aguas de consumo

Autores: Pelaéz Dioselina, Rodríguez Johanna Alexandra, Rocha Elva Lucía, Rey Benito Gloria Janneth

Resumen

Introducción: Los virus entéricos se han visto implicados en brotes de enfermedad diarreica aguda, enfermedades transmitidas por alimentos, hepatitis A y meningitis aséptica, en los que el vehículo de transmisión del agente ha sido el agua. Objetivo: Estandarizar un método de concentración para la detección de virus entéricos en aguas de consumo. Materiales y métodos: Se concentraron 20 litros de agua a un volumen de 6 ml mediante filtración y ultrafiltración tangencial. Como controles positivos se prepararon soluciones de 20 litros a concentraciones virales de 1, 10, 50 y 100 TCID50 (Tissue Culture Infectious Dose 50%) de Poliovirus Sabin de tipo 1. Las partículas virales fueron recuperadas por cultivo en células sensibles a la infección e identificadas por amplificación del genoma viral mediante reacción en cadena de la polimerasa, siguiendo los estándares internacionales de los Centers for Disease Control and Prevention (CDC) de Atlanta. Resultados: Todos los controles positivos causaron efecto citopático en células de rabdomiosarcoma y L20B y fueron detectados por RT-PCR (Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction) convencional, directamente de las muestras. Los controles negativos no mostraron efecto citopático ni amplificación viral por RT-PCR. Conclusiones: La ultrafiltración tangencial mostró ser un método rápido y eficaz al recuperar virus desde una TCID50, además de ser reproducible y sencillo. Tiene la ventaja de permitir la detección de su capacidad de contagiosidad viral por el cultivo celular, y la identificación por RT-PCR.

Palabras clave: Poliovirus enterovirus efecto citopático viral reacción en cadena de la polimerasa de transcriptasa inversa calidad del agua.

2010-09-17   |   757 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 30 Núm.2. Abril-Junio 2010 Pags. 276-282 Biomédica 2010; 30(2)