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Las técnicas de biología molecular son de gran utilidad, en especial para el diagnóstico de microorganismos difíciles de caracterizar a través de métodos convencionales. Para detectar la presencia de un ácido nucleico (ADN o ARN) de un microorganismo patógeno en una muestra clínica, que es lo que se denomina “diana”, se utilizan técnicas de biología molecular, procediendo a su hibridación con sondas de ácidos nucleicos o de ser necesario, si no existe suficiente cantidad de diana en l amuestra, a la amplificación de ácidos nucleicos para su posterior detección. Hay que mencionar que como paso previo a la aplicación de cualquier de estas técnicas es necesario liberar la diana, es decir, aislar el ADN o ARN que hay que detectar ya que éstos se encuentran en el interior del microorganismo; este proceso es lo que se conoce como “extracción de ácidos nucleicos”. Existen diversos métodos de extracción y el procedimiento elegido depende del tipo de muestra, la cantidad de microorganismos presente y la naturaleza del ácido nucleico. En la actualidad existen equipos de extracción que combinan la acción de agentes químicos (tiocinato de guanidina), agentes enzimáticos (proteasa K), solventes orgánicos (alcohol o acetona) y medios físicos (partículas de sílice o filtración por membranas), estos métodos están al alcance de la mayoría de los laboratorios y tienen la ventaja de su gran sensibilidad y relativa sencillez. Una vez extraída la diana, se puede proceder a la detección de los ácidos nucleicos propiamente dicha.

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2010-11-03   |   3,324 visitas   |   25 valoraciones

Vol. 4 Núm.42. Enero 2008 Pags. Odont Moder 2008; 4(42)