Resumen

Objetivo: Aislar y caracterizar in silico un transcrito del gen de fosfolipasa A₂ (PLA₂) aislado del veneno de Lachesis muta de la Amazonía peruana. Materiales y métodos: Se amplificó el transcrito del gen sPLA₂ mediante la técnica de RT-PCR a partir de RNA total utilizando cebadores específicos, el producto de DNA amplificado se insertó en el vector pGEM para su posterior secuenciación. Mediante análisis bioinformático de la secuencia nucleotídica se determinó un marco de lectura abierta de 414 nucleótidos que codifica 138 aminoácidos, incluyendo16 aminoácidos del péptido señal, el peso molecular y el pI fueron de 13 976 kDa y 5,66 respectivamente. Resultados: La secuencia aminoacídica denominada Lm-PLA₂- Perú, contiene Asp49, así como Tyr-28, Gly-30, Gly-32, His-48, Tyr52, Asp99 importantes para la actividad enzimática. La comparación de Lm-PLA2-Perú con las secuencias aminoacídicas de los bancos de datos mostró 93% de similitud con las sPLA₂ de Lachesis stenophrys y más del 80% con otras sPLA₂ de venenos de la familia Viperidae. El análisis filogenético de la secuencia nucleotídica del transcrito del gen sPLA₂ indica que Lm-PLA₂-Perú se agrupa con otras sPLA₂ [Asp²] ácidas previamente aisladas del veneno de Bothriechis schlegelii con un 89% de identidad. El modelaje tridimensional de Lm-PLA₂-Perú, presenta una estructura característica de sPLA₂ del Grupo II formada por tres hélices-α, una lámina-β, una hélice corta y un lazo de unión con calcio. Conclusión: La secuencia nucleotídica corresponde al primer transcripto del gen de PLA₂ clonado a partir del veneno de la serpiente Lachesis muta, que habita en la selva del Perú.

Palabras clave: Fosfolipasas A₂ lachesis muta venenos de serpiente clonación molecular biología computacional.

2011-02-02   |   715 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 27 Núm.4. Octubre-Diciembre 2010 Pags. 532-539 Rev Peru Med Exp Salud Publica 2010; 27(4)