Resumen

Introducción: El cotransportador Na⁺/HCO₃ - (NBC) cardíaco es un importante mecanismo alcalinizante encargado de regular el pH intracelular (pH_i) en las células cardíacas. En el corazón se han identificado al menos 3 isoformas del NBC: 1 electroneutra (NBC3), con estequiometría 1 Na⁺/ 1 HCO³ - , y 2 electrogénicas (NBC1 y NBC4), las cuales introducen 2 moléculas de HCO³ - por cada 1 de Na⁺. Dado que este último mecanismo genera una corriente aniónica repolarizante, su correcto funcionamiento es relevante en el control de la forma y duración del potencial de acción (PA). Material y método: En este trabajo diseñamos anticuerpos contra el dominio extracelular 3 del NBC1 (a-L3) con el objeto de profundizar el estudio de su participación en la fisiología de la célula cardíaca, utilizando miocitos ventriculares de rata Wistar. Se estudió la actividad del NBC total en la recuperación del pHi tras la imposición de una acidosis intracelular (pulsos de amonio; se obtiene el flujo de H⁺ [J_H] a pH_i 6,8), y la actividad exclusiva del NBC electrogénico durante la despolarización con alto K⁺ (pulsos de K⁺, ΔpH_i, a los 14 minutos de la despolarización). El asterisco (*) indica p < 0,05 respecto del control. Resultados: El a-L3 reconoció a la proteína del NBC1 en preparados ventriculares. La alcalinización secundaria al alto K⁺ quedó totalmente abolida en presencia del a-L3 (0,17 ± 0,02; n = 6 vs 0,02 ± 0,02; n = 5*). El a-L3 redujo un 50% al J_H durante la recuperación de la acidosis (3,3 ± 0,4; n = 86 vs 1,71 ± 0,3; n = 4*). En experimentos de patch-clamp perforado, el a-L3 prolongó la duración del PA 12,5 ± 1,9% (n = 4), de manera consistente con el bloqueo del NBC1. Conclusiones: El NBC1 es la única isoforma electrogénica activa en los miocitos ventriculares, participando equitativamente junto a la isoforma electroneutra NBC3 en la recuperación de la acidosis. Además la corriente aniónica generada por el NBC1 se perfila como el principal componente de la corriente repolarizante imputada al NBC electrogénico. El uso del a-L3 podría ser relevante en el estudio diferencial de las isoformas del NBC en la fisiopatología cardiovascular.

Palabras clave: Miocitos cardíacos pH intracelular cotransporte sodio/bicarbonato.

2011-08-18   |   972 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 40 Núm.1. Enero-Marzo 2011 Pags. 32-40 Rev Fed Arg Cardiol 2011; 40(1)