Fragmento

La orina puede ser muy útil para el aislamiento de ADN, debido a que no es invasiva; el volumen de la muestra no está restringido y se realiza fácilmente. Se obtuvieron 46 muestras de orina de voluntarios sanos (24 hombres y 22 mujeres), e inmediatamente se centrifugó a 13,000 rpm durante 20 minutos, manteniéndose a 4°C durante la noche. Se obtuvo el consentimiento informado de todos los participantes del estudio. El aislamiento del ADN se llevó a cabo con una modificación del protocolo de precipitación salina (Salting out). Los valores de mediana obtenidos fueron: 29.25 ng para los hombres y 29.20 ng para las mujeres. Para analizar la calidad del ADN, se realizó PCR con 5 marcadores STRs: D16S539, D7S820, D13S317, D5S818 y penta D. Los productos de la PCR fueron separados por electroforesis en geles de desnaturalización de poliacrilamida y teñidos con plata. Todos los marcadores fueron tipificados con éxito con un rendimiento del 85%; la tasa de tipificación se disminuye con la longitud del amplicón. El porcentaje de amplificación mostró una tendencia decreciente con respecto a la longitud del amplicón, resultado que está de acuerdo con otros estudios. Estos resultados indican que la orina es una muestra adecuada para la amplificación de ADN, y con la modificación llevada a cabo, el procedimiento presenta costos muy bajos en comparación con el alto costo de los kits comerciales.

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2013-07-15   |   870 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 73 Núm.3. Mayo-Junio 2013 Pags. 150-151 Rev Mex Urol 2013; 73(3)